近年来，随着肺癌靶向治疗领域的快速进展，精准的分子病理检测已成为实施靶向治疗的基础和前提。选择精准、快速、有效的分子分型检测方法，筛选出适合靶向治疗的目标患者人群，对于指导临床实践具有重要意义。地市和县域医疗机构应根据各中心具体情况尽可能开展分子检测（推荐），尤其是FISH技术或/和PCR平台。若无条件开展，应做好检测前标本质控（强烈推荐），以满足上级医院或区域中心机构等有条件单位检测需求。
1. 分子病理的检测方法和样本类型：随着新一代分子生物学技术的进步，生物标志物检测和分子分型手段日益多样化。各类检测技术具有独特的优势和适用范围，具体特点可参考《非小细胞肺癌分子病理检测临床实践指南（2024版）》。
NSCLC的分子病理检测应优先采用经手术切除或活检获取的福尔马林固定石蜡包埋肿瘤组织标本。检测前需通过病理评估确认肿瘤细胞占比（通常要求≥20%）。对于细胞学标本离心沉渣或细胞蜡块，需在评估肿瘤细胞含量（≥200个细胞）符合要求后方可进行检测（强烈推荐）。对于极少数无法获取组织或细胞学标本的晚期肺癌患者，可考虑采用液体活检，检测外周血、脑脊液或胸腔积液等体液标本中的游离肿瘤DNA（弱推荐），但由于液体活检分子检测的灵敏度较组织标本低，对于液体样本检测的阴性结果，建议谨慎解读，必要时组织样本复检。
2. NSCLC分子病理的检测内容：研究表明，NSCLC精准治疗可以显著提高患者疗效，且随着分子检测技术的不断发展，越来越多的基因及位点被发现。在《非小细胞肺癌分子病理检测临床实践指南（2024版）》推荐基础上，结合近期国内新增上市相关药物，可将其分为必检基因（强烈推荐）和扩展基因（弱推荐），各基因的变异形式特征及推荐检测方法见表3。NSCLC免疫治疗相关分子病理标志物除PD-L1表达外，还包括肿瘤突变负荷（tumor mutation burden， TMB）。此外，根据临床诊治NSCLC患者的具体需求，可进行微小残留病灶（minimal residual disease， MRD）的动态监测，以评估治疗效果和预测疾病复发风险。但由于地市和县域医疗机构条件所限，TMB和MRD指标暂不推荐。对于有条件的医疗或检测机构，基因检测优先推荐多基因联检，选用RT-PCR平台（强烈推荐）或NGS平台（推荐），应尽可能避免单基因续贯检测，尤其对于晚期初诊初治患者（强烈推荐）。
3. NSCLC分子病理的适用人群：肺癌的诊治是一个持续监测与动态调整的过程，精准诊疗理念不仅局限于初始治疗方案的选择，还需要后续定期的基因检测，这样有助于监控患者治疗期间的病情变化，准确评估治疗效果，从而及时调整治疗策略，以确保患者能够获得最佳的临床获益。不同临床分期患者推荐检测内容及方法见表4。
4. 分子病理的质控体系（强烈推荐）：临床实践中，构建完善的质控体系是确保检测结果准确性和可靠性的关键，对于地市和县域医疗机构，更应该关注样本质控环节。该体系包括室内质控和室间质评两部分。室内质控涵盖检测前、检测中及检测后全流程：检测前需评估送检样本固定是否及时和充分、肿瘤细胞占比是否达标（占比至少20%及以上）等，以确保符合检测要求。在样本前处理过程中应严格防范交叉污染，如使用一次性镊子、棉签等耗材，每例样本切片前需对切片机工作台面进行彻底清洁，每例样本切片时应更换新刀口等。若本单位不具备检测条件需外送服务，建议优先提供肿瘤组织蜡块；如仅能提供石蜡切片，活检样本需准备15～20张切片（3～5 μm/张），手术样本需准备5～10张切片（3～5 μm/张），具体切片厚度和数量可根据不同检测平台和项目要求进行调整。切片应贴附于载玻片（FISH检测需防脱载玻片，PCR/NGS检测普通载玻片），60 ℃烤片0.5 h为宜，并附上病理报告。
有条件实验室检测中需严格按照标准操作规程进行日常实验操作及相关质控，如核酸浓度、DNA片段完整性等，并通过设置阴阳性对照、内参基因监控等保障检测体系的稳定；检测后包括结果复核、报告和解读、报告的保存和样本的保存等。实验室需定期审核质控数据，包括但不限于：分子标志物变异频率是否符合流行病学预期；不同操作员间的实验结果一致性；以及使用不同试剂、仪器或平台时的实验结果比较。此外，实验室宜定期参加室间质评，通过参与权威机构组织的实验室间比对（如国家病理质控中心、国家卫生健康委临床检验中心及各省级病理质控中心举办的室间质评活动等），验证实验室检测能力，并针对偏差进行整改，以确保不同实验室之间检测结果的可比性。室内质控和室间质评二者结合，可系统性降低技术和人为误差，以满足临床及行业指南（如中国临床肿瘤学会、美国国立综合癌症网络等）对分子检测的质控要求，为肺癌精准诊疗提供可靠依据。
5. 分子病理检测策略与临床病理沟通（强烈推荐）：肺癌病理诊断集合了组织病理、免疫组化与分子病理多个部分，是一个综合诊断的过程。各单位应通过多学科会诊等方式促进临床与病理沟通、建立适合本单位的分子病理检测路径。优化肺活检标本样本制备流程，利用有限的样本完成包括分子检测在内的全部诊断工作。
参考文献：
中国抗癌协会肿瘤病理专业委员会肺癌学组, 地市和县域医院肺癌病理规范化诊断共识专家组. 地市和县域肺癌病理诊断专家共识（2025版）[J]. 中华肿瘤杂志, 2025, 47(12): 1137-1151. DOI: 10.3760/cma.j.cn112152-20250428-00188
CACA：地市和县域肺癌病理诊断专家共识（2025版）
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